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如何准备组织学切片

图像显示一些组织切片准备所需的工具

如果你从事的是生物研究,你很有可能在某个阶段向组织实验室提交了组织样本。他们神奇地为你制作了美丽的载玻片——每个载玻片都包含你标本的薄片,可以用显微镜进行评估。

你有没有想过组织技术员是如何做组织学切片准备的?继续阅读组织切片制作的五个重要阶段。

组织切片制备的五步

1.组织固定

切片准备从固定组织标本开始。这是组织制备的关键步骤,其目的是防止组织自溶和腐败。为了得到最好的结果,您的生物组织样本采集后应立即转入固定液。

虽然固定剂的种类很多,但大多数标本是用10%的中性缓冲福尔马林固定。最佳福尔马林与标本的体积比应至少为10:1(例如,每1厘米含10ml福尔马林3.的组织)。这将允许大多数组织在24-48小时内充分固定。福尔马林容器应盖好并防漏,并正确贴上标签。

2.标本转移到磁带中

固定后,用手术刀修剪标本,使其适合于适当标记的组织盒。标本不应该太大以至于装满了磁带-它们被修剪以免碰到边缘。此外,它们不能太厚(理想情况下,它们应该小于4毫米),否则,当盒盖关闭时,它们有被“华夫化”的风险。在加工开始前,填充好的组织盒被保存在福尔马林中。

3.组织处理

通常使用石蜡块将组织加工成显微镜下的薄片,如下所示:

  1. 脱水方法是将样本浸入浓度越来越高的酒精中,以去除组织中的水和福尔马林。
  2. 清算,其中使用二甲苯等有机溶剂除去酒精,并允许石蜡渗入。
  3. 嵌入在那里,标本被包埋剂(通常是石蜡)浸润。组织被一大块熔化的石蜡包围,形成现在所说的“块”。一旦块固化,它提供了一个支持矩阵,允许非常薄的切片。

4.切片

你的组织标本现在已经准备好被切成可以放在载玻片上的切片了。

  1. 将蜡从块的表面去除,暴露组织。
  2. 切片前,将冰块放在冷藏盘或冰盘上冷却10分钟。
  3. 切片机是用来将极薄的组织切片以缎带的形式从切片块上切下来。

切片机可以预先设定切割不同厚度,但大多数组织切割时间在5µm左右。你会发现这里有更多的组织切片方法

一旦切断,组织丝带被小心地转移到温水浴中。在这里,它们可以漂浮在水面上,然后被铲到放置在水面下的滑梯上。带电载玻片在这一过程中效果最好——它们改善了组织与玻璃的粘附,并有助于减少染色过程中切片被冲洗掉的机会。

载玻片应清楚标记,然后让其在37度直立晾干o放置几个小时,轻轻地融化多余的石蜡,使组织切片完好无损。

5.染色

大多数细胞是透明的,不染色时几乎无色。因此,组织化学染色(通常是苏木精和伊红)被用来提供组织切片对比,使组织结构更可见和更容易评估。在染色后,用光学级胶水在载玻片上的组织标本上安装一个覆盖物,以帮助保护标本。

组织学切片准备完毕

所以正如你所看到的,组织切片的准备是一件非常复杂的工作!虽然你可能想要学习如何做这有助于在实验室削减成本,我建议你三思而后行,而不是送标本到组织实验室进行这一目的-特别是如果组织评估是你的研究的一个重要部分。把这份工作交给一位经验丰富的组织学技术人员,你会为自己节省很多压力和时间,你的幻灯片也会更容易评估。

虽然组织学对整个组织的低分辨率成像很好,但如果你想研究亚细胞结构,比如研究脑肿瘤的变化,它是有限的。在这种情况下,更详细和强大的技术,如脑癌电子显微镜是必需的。

如果组织学有足够的分辨率满足您的需要,您是愿意自己制作切片,还是把组织送到组织学实验室处理?请在下方留言。

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最初发表于2012年4月4日。2020年11月19日审查和更新。

图像显示一些组织切片准备所需的工具

11日评论

  1. 艾萨克kwagam 2020年2月20日5:01分

    它对组织加工更清晰,简明扼要



  2. 本杰明Azumah 2020年2月11日晚上9:19

    这太棒了。



  3. 萨德Adebowale 2019年4月14日12:06

    这是简短和完美的。谢谢你!



    • 瓦利德穆萨 2020年2月17日8:04分

      这是一个简明扼要的写作!!



  4. 2018年11月18日凌晨1:43

    你能告诉我你的推荐信吗?



  5. 伊冯 2018年9月14日下午3:34

    谢谢你提供的信息。
    然而,我希望你能在“染色”方面展开更多。



  6. 部长阿里 2018年1月29日下午3:20

    是的,这对每个人都很有用。谢谢你关于组织的有用信息。最好的运气。



  7. 康复中心 2017年9月25日晚上8:07

    谢谢,这是一个非常有用的组织学修正



  8. shireen 2017年9月23日12:52

    对于组织取样和组织切片的制备来说,这是一个更有利、更好的位置。



  9. habiburrahman拉希米 2017年5月7日上午8:07

    最适合组织加工的文章,谢谢



  10. gidey特 2017年3月20日下午4:10

    这是非常详细的组织处理的解释,并以一种容易理解的方式呈现!



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