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组织学中的组织加工:到底发生了什么?

卫生纸的图像,作为一个组织处理的双关语为组织学

当准备一个样本(或多个样本)进行组织学检查时,需要多个步骤。我们在前面的一篇文章中简要介绍了这些步骤如何制备组织学切片,但本文将集中讨论在组织固定和石蜡块包埋/切片之间需要进行的一个特殊过程:组织病理学处理。

你不能简单地把固定的组织植入其中!我们已经介绍了组织固定组织嵌入/切片之前,请阅读这些文章以获得更多关于组织准备的其他步骤的信息。

在这篇文章中,我们专注于这个中间阶段的传统组织处理为组织学。

6 .组织处理步骤

1.拿出你的铅笔

固定后,将组织样本转移到组织盒中。它们有各种大小,在组织加工过程中保持和保护组织。

一旦到达嵌入阶段,盒式磁带盖被折断,盒式磁带的主要部分形成一个基础的石蜡块。磁带可以用手(用铅笔!)或者你的组织实验室可能有磁带贴标机。

组织的处理主要有三个步骤:“脱水”、“清除”和“浸润”。该处理方法的每个步骤都涉及到将溶液扩散到组织中,以及在该系列中分散之前的溶液。

2.旋转木马的所有乐趣

在大多数现代研究所和实验室中,用于组织学的组织加工将在专门的组织加工机器中进行。旧的机器设计是一个旋转木马,其中包含一个笼子,组织盒放置。

这个旋转木马有许多装有溶剂和溶液的玻璃烧杯,以确保组织被脱水和清除,为石蜡包埋做好准备。在进入脱水/清除方法中的下一个溶液之前,旋转木马在每个溶液中垂直地搅动罐笼。

现代的处理器有一个存放样品的腔室,不同的溶液被泵入腔室或泵出腔室。一般来说,整个过程大约需要6个小时,通常设置为通宵运行。

3.首先,去除水

首先,组织需要脱水以去除游离或附着在组织上的水分。石蜡是疏水的;因此,组织中的大部分水分必须被清除,才能被蜡渗透。

去除水分的方法是将组织浸入一系列浓度不断增加的乙醇溶液中,直到达到100%无水酒精。使用一系列不断增加的浓度,以确保组织中的水逐渐被酒精取代,并避免组织的过度扭曲。

在这个过程中,细胞的各种成分也会被去除。在乙醇浓度的下端,水溶蛋白被去除,而接近100%乙醇的步骤,某些脂质可能被溶解。

4.乙醇和蜡不能混合

虽然组织在100%的乙醇中达到脱水的最后阶段,但不可能直接进行蜡包埋,因为乙醇和蜡不混合!

这时就需要组织清理了。“清除”一词指的是所用溶剂的性质——它们具有相对较高的折射率,当组织浸入其中时,它变得透明而清晰。

5.它变得清晰…

这一中间阶段所用的溶剂通常是二甲苯。这种“清洗剂”需要与乙醇和石蜡混溶。

脱水后,将组织浸入一到三种不同的二甲苯溶液中。在这些阶段,乙醇逐渐被二甲苯所取代,当组织被嵌入时,二甲苯将被熔化的石蜡所取代。

在这些最后阶段,组织的收缩会发生,因为二甲苯也会去除残留在样品中的脂肪。

6.终于——一个街区!

最后一个阶段叫做“渗透”和“封锁”。渗透是当最后的二甲苯被熔化的蜡所取代,它渗透到组织中。同样,这通常是三种不同的蜡浸泡,以确保没有任何清除剂留在组织中。

最后浸润后,将组织盒转移到包埋站。这台机器有熔蜡储层、热板和用于设置组织块的冷板。

浸润的组织从盒中取出,并在一个合适大小的金属模具中定位。模具中充满了熔化的蜡,标签盒的主要部分放在顶部,这也充满了蜡。整个模具被转移到冷板上最终定型。

这结束了从组织到蜡块的旅程,我想,这是另一个旅程的开始,切片,制作幻灯片,和免疫组化!

最后,下面的表格强调了组织病理学的典型主要阶段。

表1。组织加工的主要阶段。

过程 解决方案 时间
脱水 70%的酒精 60分钟
脱水 90%的酒精 45分钟
脱水 无水酒精 45分钟
脱水 无水酒精 45分钟
脱水 无水酒精 60分钟
清算 二甲苯 60分钟
清算 二甲苯 60分钟
清算 二甲苯 60分钟
渗透 石蜡 30分钟
渗透 石蜡 60分钟
渗透 石蜡 90分钟
阻塞了 石蜡 N/A

你对组织处理有什么问题吗组织学显微镜?请在下方留言!

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最初出版于2013年12月10日。审查和更新2021年10月。

30的评论

  1. Lordress 2019年12月9日12:06

    什么会导致你的加工试剂混浊?



  2. 塔尔 2019年10月18日12:41分

    如何校准组织处理机??



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