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我应该使用哪种乙醇?

三个小酒杯和一个透明的玻璃瓶,瓶子里装着透明的酒精液体,代表实验室中可以使用的乙醇等级

想知道更多实验室常用的乙醇等级吗?你已经知道乙醇非常有用。它非常适合杀死细菌,点燃东西,迫使核酸从溶液中出来。但并不是所有的乙醇都是平等的,也不是所有种类的乙醇都适合于所有的任务。

为了帮助您了解您的燃烧室内阁,这是通常用于分子生物学中的乙醇成绩的损失,以及如何正确使用它们的一些重要规则。bob网站app

3分子生物学中的乙醇等级bob网站app

乙醇在微生物学中有许多用途。bob网站app它用于生物分子的纯化和沉淀、组织学标本的染色和保留、组织包埋前的脱水和消毒。实验室常用的乙醇有三种等级。

1)95%(95.6%)乙醇

这是最高浓度的乙醇,因为95.6%乙醇是一种共沸物,这意味着蒸汽状态与液态具有相同的乙醇 - 水比。

2)绝对(99-100%)乙醇

对水存在敏感的一些程序需要绝对乙醇。产生高于95%浓度的乙醇的常用方法是使用破坏共沸组合物并进一步蒸馏的添加剂。因此,绝对乙醇有时含有痕量这些添加剂(如苯)。

无水乙醇是吸湿的(它吸引水),所以不要期望它保持“100%”乙醇长时间,如果它不加盖子。

3)变性乙醇

变性乙醇(95%或绝对)含有添加剂(如甲醇和异丙醇),使其不安全饮用,因此免于某些饮料税。这使得它比纯乙醇便宜​​。在所有的乙醇等级中,这是您最有可能在实验室中消毒的人。

分子生物学用乙醇bob网站app

你不应该使用变性乙醇沉淀核酸,因为一些添加剂会干扰下游的应用。这有点难以预测,因为不同生产商使用的添加剂不同,但最安全的做法是完全避免使用变性乙醇。

可以使用不变性乙醇,但是可以使用95%或100%的乙醇,但是当使用荧光标记的核酸时,我不使用绝对乙醇,以避免来自残留苯的背景荧光。

乙醇对消毒

除了成本的大量差异,您对消毒的乙醇级别并不重要,因此大多数实验室使用变性库存。物质是最终的乙醇浓度。乙醇是一种有效的消毒剂,浓度为70%和90%。

尽管这似乎与直觉相反,70%的乙醇似乎是最有效的浓度,因为90%的乙醇凝结蛋白质,而形成的蛋白质层有效地使细胞休眠。

然而,在70%的浓度下,乙醇需要更长的时间蒸发,这一较长的接触时间意味着它能够更有效地渗透细胞。70%的水对蛋白质变性也很重要。70%的乙醇也更便宜,更不易燃。(这都是相对的;它仍然非常易燃!)

但是,在稀释乙醇时,有几件事要注意:

  • 首先,稀释的乙醇不再是共沸物,因此蒸发损失将导致乙醇浓度逐渐降低。当一个70%乙醇'停止工作'的未密封烧杯时不要感到惊讶。
  • 第二,乙醇/水混合物没有添加体积。这意味着如果你想从无水乙醇中得到1升70%的乙醇,你不能把700毫升乙醇和300毫升水混合。正确的方法是测量700毫升乙醇,然后将其与水混合到1升的体积。

理解消失量:为什么水和乙醇混合物没有添加量

你会问,为什么乙醇/水的混合物没有添加体积?答案分为两部分:

  1. 水分子彼此形成氢键,这在水分子之间留下了大量空间。
  2. 乙醇分子小于水分子。

这两个因素意味着当你混合水和乙醇时,乙醇分子占据水分子之间的空间。一种有用的方式来可视化这一点是考虑沙子和岩石 - 如果你要混合每次1升,你不会得到2升的最终体积,因为沙子会落在岩石之间。

还存在显着的分子间力,包括氢键和偶极 - 偶极子戏剧的互动,但这是另一天的故事。对于日常的实验室生活,您只需要记住流体体积(即液体和气体)并不总是必然添加的,并且可能存在消失的体积。

参考文献

  1. Ali,Y,Dolan,MJ,Fe​​ndler,EJ和Larson,EJ(2001),酒精的消毒、灭菌和保存ed. Block, SS, 5TH.埃德,费城:lea&febiger。

最初发表于2012年6月13日。2021年4月审查和更新。

三个小酒杯和一个透明的玻璃瓶,瓶子里装着透明的酒精液体,代表实验室中可以使用的乙醇等级

5点评论

  1. Elizabeth Altenhein 2019年11月22日在晚上11:04

    如果99%的乙醇可以通过无菌技术用于治疗甲状腺囊肿你能得到小蚂蚁吗



  2. 克里斯蒂安娜Aanu 2019年6月16日下午3点11分

    如果生物乙醇中含有水我该怎么去除水的混合物?



  3. 2019年4月4日下午9点01分

    “乙醇是一种有效的消毒剂,浓度为70%至90%。奇怪的是,没有人已经实际建立了为什么未稀释的乙醇不会像稀释的乙醇一样快速杀死某些种类的细菌,尽管最可能的原因只是乙醇水溶液是比无水乙醇的更加有效的蛋白质变性。“

    请直接来源。?

    有丰富的研究表明各种醇类在不同浓度下的功效率。虽然90%乙醇可能会杀死细菌,但它可能需要数小时的时间浸泡时间来充分杀死。70%是全细菌杀死最有效和最快速的,而不是当然的孢子。70%也有其他优点。它的更便宜,易燃,较少的VOC。它蒸发较慢,因此需要较少的应用。表面上的磨蚀性较少。



  4. HO / 14. 2017年7月27日下午7:33

    我的实验室非常重视关于EtOH沉淀的帖子。谢谢你!

    我们有过期的无水乙醇。我很想知道使用它会带来什么问题。我知道这个溶液是吸湿的,当盖子一直开着的时候,我们现在的酒精含量可能比原来的要低。这是唯一需要担心的事情吗?如果是这样的话,是否存在某种平衡使得这个溶液能够定义乙醇与水的比例?



  5. 2016年3月8日下午12:43

    嗨,我想询问99%的乙醇是否适合用作酒精活化妆容的溶剂?为您的信息,化妆调色板是皮肤插画家。非常感谢您的回复,谢谢。



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