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组织学染色的A到Z

艺术彩色污渍,以描绘组织学中使用的不同污渍

通过使用污渍和染料,组织学允许研究人员可视化特定组织结构,细胞,组织甚至微生物内的化学元素。组织学的出现和演化遵循显微镜检查(如上所概述)(非常)组织学的短期'。Histology, which means ‘tissue science’ became an academic discipline in its own right in the 19th century, after the French anatomist, Bichat, introduced the concept of tissue in 1801. Karl Meyer, a German anatomist, however, was the first to coin the term “histology” in 1819.

历史上,组织学家依靠易于使用的化学品。虽然已经被遗弃了一些较旧的染色方法,因为这些方法被证明是有毒的(yikes!),许多人今天仍在使用中,仍然存在时间。他们已被证明是高效,准确的,更不重要的复杂性。

BitesizeBio已经介绍了其中一些深度染色程序。本文的目的是为您提供许多可用组织污渍的简要概述。虽然绝不穷举,但下表给出了顶级染料和污渍,占据了今天的医疗/诊断组织学世界的污染。

染色快乐!

染色名称

用于染色

“有趣的事实”

1 4, 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) 核:蓝色 奥托·丹恩的实验室于1971年首次将其合成为治疗锥虫病的药物1
选择性地与双链DNA结合,没有(或很少)细胞质染色。
可以很容易地用作绿色或红色荧光标签的防染剂。
可用于染色哺乳动物,细菌和甲基细胞中的DNA。
2 酸快 棒状细菌:红色粉红色 Ziehl-neelsen方法对于1800年代首次描述的酸快红染色是最广泛的使用。
用于鉴定酸快细菌生物的差异污渍,例如白曲杆菌和诺卡氏菌的成员。
在诊断结核病中特别重要。
3. 碱性磷酸酶 多能细胞:红色/紫色 通用干细胞膜标记。
通常用于在重编程工作流程的早期阶段筛选殖民地(污渍保持干细胞活力)。
也可以用作稍后阶段的负选择工具以识别未分化的细胞。
4 Bielschowsky污渍 轴突,斑块神经癖和缠结:黑色
斑块和血管淀粉样蛋白:一般棕色至深棕色
背景:黄色到棕色
Max Bielschowsky介绍的银染色方法2他改进了Ramon y Cajal开发的方法。
它可用于可视化神经纤维。
常常用于研究阿尔茨海默病。
5 刚果红 淀粉样蛋白原纤维:浅橙红(苹果绿双折射在偏光灯下) 虽然它已经存在了一段时间,但是德国医生赫尔曼·贝纳女性是第一个发现刚果红结合淀粉样蛋白,但在1923年3.
目前仍是诊断专家鉴定组织中淀粉样蛋白(最常用于阿尔茨海默氏症患者)的“金标准”测试。
6 革兰氏染色剂 革兰氏阳性细菌:深蓝色的
革兰氏阴性细菌:红色粉红色
由Hans Christian Gram于1884年开发4
This stain classifies bacteria as either, gram-positive cells (e.g. Staphylococcus spp.), which usually has have a thicker peptidoglycan mesh, or gram-negative cells (e.g. Escherichia coli, Salmonella spp.), which usually haves a lipid-polysaccharide layer external to the peptidoglycans.
7 Grocott-Gomori's(或Gömöri)甲胺银 真菌元素:黑色(带锋利的边距和清除中心)
背景:亮绿色
一种“广谱”真菌染色,比PAS染色(见下文)更能检测退化和死亡的真菌。
特别适用于染色碳水化合物。
用于普通筛查真菌感染。
8、9 苏木精和伊红 核:蓝色(苏木精)
内质网:蓝色(苏木精)
弹性纤维:粉红色(eosin)
胶原纤维:粉红色(伊红)
网状纤维:粉红色(伊红)
红细胞:橙色/红色
最受欢迎的“通用污渍”用于常规组织制备。
苏木素是从蜀葵苏木中提取的;CG Reichel在1758年首次使用了它,但直到1865年它和明矾一起被Böhmer使用时,才产生了良好的组织学染色效果。它结合并染色酸性结构5
伊红,一种黄红染料,是由波兰化学家海因里希·卡罗合成的(他以一个他喜欢的女孩的昵称命名!)后来,德国化学家埃米尔·费舍尔(Emil Fischer)开始研究这种新型化合物,并于1875年首次发表了一篇关于伊红Y(意为“淡黄色”)的论文6。eosin结合和染色基本结构。
苏木精和伊红在1876年被化学家Wissowzky结合使用7
10 赫斯特染色 核:蓝色 由德国生命科学公司,Hoechst AG开发的蓝色荧光染料系列的一部分。
Hoechst染料特异性地结合到双链DNA的A/ t富区,不(或很少)细胞质染色。
它是比DAPI更低的染料毒性较小,细胞更渗透(见上文)。
11 Luxol快蓝 髓纤维:蓝色到蓝色/绿色
神经元:紫罗兰(当备受染色)
红细胞:蓝色
1953年由HeinrichKlüver和伊丽莎白Barrera创建的8
AIT是一种铜酞菁染料,可溶于醇并吸引到髓鞘的脂蛋白中发现的碱。
通常用于检测中枢神经系统的髓鞘化。
经常伴有占有(例如苏木精和曙红)。
12 亚甲蓝 细胞核和细胞质:蓝色 与组织中的阴离子(如羧酸、硫酸和磷酸基团)结合的阳离子染料。
13 油红O 中性甘油三酯和脂质(冷冻切片),脂蛋白(石蜡切片)和Lipofuscin:明亮的红色 1926年由RW French引入9
与苏丹染料密切相关
用于证明新鲜的冷冻组织切片中的脂肪或脂质的存在。
也用于法医病理学以增强油性手指产生的潜在印刷品。
14 定期酸性席 糖原和其他碳水化合物:洋红色
核:蓝色
胶原纤维:粉红色
用于研究/诊断基底膜的糖原储存疾病或疾病。
苏木素通常用作染色剂以显示其他组织成分。
当PAS用于展示真菌生物时,优选浅绿色反迹。
15 Perl的普鲁士蓝 铁矿床:蓝色或紫色
其他组织成分:红色(中性红染色时)
Prussian Blue于1704年由化学家们意外开发,但首次被德国病理学家Max Perls作为组织学污染,于1867年被介绍10
重要的污渍,用于鉴定血液素患者(在细胞内部发现的铁储存复合物类型)沉积物,例如在一些肝脏疾病或溶血性贫血中。
16 苏丹黑B 中性甘油三酯和脂质(冷冻切片);一些脂蛋白(石蜡嵌入部分):蓝黑色
核:红色
类似于其他合成苏丹污渍(包括油红O)。
通常是组织切片被染色(血液杂志/核快速红色)。
也可以用于染成髓细胞,但不能染成淋巴细胞。
17 托布尼廷蓝色 肥大细胞颗粒和多糖:紫罗兰色
核:蓝色
细胞质:蓝色
红细胞:蓝色
胶原纤维:蓝色
1856年由William Henry Perkin开发11
选择性地染色酸性组织成分的基本染料。
它还用于染色用于电子显微镜的树脂嵌入式组织的薄切片,以帮助样品的取向和抑制。
18 richrome. 胶原蛋白,骨头:绿色
肌肉、纤维蛋白、细胞质:红色
红细胞:黄色或红色
核:深红色
19世纪初,由病理学家Claude L. Pierre Masson制定了原始的Trichrome食谱12
利用三种(酸性)染料产生不同颜色(碱性)组织成分的技术。
这种染色是常规用于诊断实验室,以评估肝病,如肝硬化。
各种染色方法存在,其中Masson’s tricrome和Gömöri’s tricrome是目前最常用的。
19 Verhoeff-van Gieson污点 弹性纤维和细胞核:黑色(Verhoeff组件)
胶原蛋白和肌肉:红色(van Gieson组件)
细胞细胞质和其他组分:黄色
IRA van Gieson于1889年首次描述了该染色程序131908年,弗雷德里克·赫尔曼·Verhoeff对其进行了改进14
Verhoeff成分是铁苏木精染色剂,而van Gieson成分是胶原蛋白特异性复染剂,由苦味酸和酸性品红组成。
用于验证组织中弹性纤维的存在或不存在。
20. Warthin-Starry 微生物:深棕色至黑色
背景:金棕色(由于较低浓度的银沉积物)
最早由美国病理学家奥尔德雷德·斯科特·沃辛和艾伦·克里斯特·斯达里于1920年发明15
基于硝酸银的染色方法
被认为是检测革兰氏阴性生物体,如小杆菌和螺旋体的最佳方法。

我们有没有漏掉你实验室常用的组织学染色剂?下面的评论。

参考:

  1. 丹,O。。(1971)。锥虫二苯胺?香豆酮、二苯?indens和2苯基?吲哚。Justus Liebigs Ann。Chem.。,749:68-89。
  2. Bielschowsky,M.(1908)EINE Modifikation MeinesSilverimprägnationsverfahrenszurdarstellung der Neurofibren。JFürSpicalologieneurologie。,12:135-137
  3. Bennhold, H. (1923) Über die Ausscheidung intravenös einverleibten Kongorotes bei verschiedensten Erkrankungen inbesonderbei bei淀粉样变。拱门凯林。,142:32-46
  4. 克,H.C.J.,和Friedlaender,C。(1884)Ueber DieIrteFärbungder Schizomyceten:在施奈特 - 伯克伦普拉多滕。Theodor Fischer的Medicinischer Buchhandlung。
  5. 蒂福,M.(2005)苏木精的悠久历史。Biotechnic &组织化学80.2(2005): 73 - 78。
  6. 费舍尔,大肠(1876)。伊红染色剂für mikroskopische Präparate。档案für mikroskopische anatomy,12(1),349-352。
  7. 维索斯基,A.(1877)尤伯的伊奥新里根在Hämoglobin和教育Blutgefässen和Blutkörperchen bei Säugethier- und Hühnerembryonen。档案für mikroskopische anatomy13: 479 - 496。
  8. Klüver,H.和Barrera,E。(1953)一种用于在神经系统中染色细胞和纤维的方法。J Neuropath Exp Neurol。,12:400-403。
  9. 法语,R. W.(1926)。脂肪污渍。染色技术。,1:79。
  10. Perls,M。(1867)Gewissen Pigmenten中的Nachweis von艾森佐德。virchows arch.。,39:42-48。
  11. Perkin, W. H.和Church, A. H. (1856) Jahresbericht ueber死于Chemie和Verwandter Theile Anderer Wissenschaften。J化学Soc8: 48。
  12. Masson,P。(1929)一些组织学方法:三色染色及其初步技术。J技术方法。,12:75-90。
  13. Van Gieson,I。(1889)神经系统技术方法的实验室备注。(血红素素,酸紫素和麦克酸作为神经组织染色)。美国医学杂志50:57-60。
  14. Verhoeff F.H.(1908)一些适用性广泛的新染色方法。贾马50:876 - 877。
  15. Warthin,A.S.和Chronister,A.c。(1920)。一种更快速和改善的螺旋体在组织中展示(Warthin和Starry的覆盖玻璃方法)。am j serphilis.4: 97 - 103。

更多阅读:

Suvarna SK, Layton C, Bancroft JD (2013) Bancrofts 's theory and practice of组织学技术。伦敦:丘吉尔·利文斯通·爱思唯尔。

艺术彩色污渍,以描绘组织学中使用的不同污渍

5个评论

  1. 艾哈迈德王 在3月6日,2020年下午6:41

    真的100%理解了,谢谢我朋友的帮助

  2. Linda恩纳斯 2019年11月18日在下午7:23

    和苯胺蓝色胼蓝色。

  3. Kiriella PA 2017年12月1日下午3:29

    这是非常好的和有用的文章。

  4. 卡罗尔•贝勒斯 2017年10月12日下午2:12

    台盼蓝,细胞的常见活/死染色,当与蛋白质结合时,也荧光。可用于染色其他未标记的细胞用于共聚焦显微镜。实际上许多这些染料可能荧光,H&E当然呢。

  5. Alex Rajewski. 2017年9月6日晚8:49

    哦NOES,你遗漏了植物组织的经典steins!用于木质素,Safranin和快速绿色或星形蓝色的甘油糖醇......好吧,只是关于一切,和碘淀粉

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