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擅长使用Excel:分析方法验证采用LOD和LOQ

一个人有一个红色的领带,红色斗篷傲立。

重点是什么?

执行非确立的分析方法时,一个需要统计学验证它。如果不这样做,你可能最终得到错误的结果和浪费时间和资源。检测(LOD)和定量限(LOQ)的极限的极限是用于验证分析方法的两个关键参数。本文将描述什么LOD和LOQ是,他们的方法验证的重要性,最后一个快速的方法来计算使用Excel这些值。

什么是LOD和LOQ?

LOD和LOQ的意思正是这些条款建议。它们是可以分别可靠地检测和定量,使用分析方法/仪器化合物(分析物)的最小量。[1]

当测量的分析物的浓度,分析物必须产生比分析噪声,即,在不存在分析物的所获得的信号的信号大。[1]如果分析物浓度太低,分析物信号不能从分析噪声区分开。出于这个原因,一个限制设置用于检测分析物(LOD),其比落于分析噪声区中的信号更高的。这确保了信号确因被分析物,而不是由于分析噪声。

计算LOD和LOQ的重要性

在验证一个新的分析方法

新的分析技术可以有超过尝试和正确的方法有很多优点。例如,HPLTC可以更具成本效益和敏感比更传统的HPLC。如果分析物的浓度计划使用您开发是LOD和/或LOQ低于特定的分析方法来检测,则检测信号不能被信任。为了确保数据准确可靠,以计算任何新的分析技术的LOD和LOQ是很重要的。

在验证建立的分析方法

这也是明智计算LOD和LOQ为已经建立的方法。虽然你可能请尽量避免引入人为错误,还有这种事情发生的一个很好的机会。例如,吸取错误进行连续稀释液时,以制备标准曲线可导致变化的响应。此外,每一个分析技术的灵敏度与仪器不同。因此,你刚绘制的标准曲线需要的统计验证,以确保您的测试样品的反应是检测/定量的范围内。

计算LOD和LOQ使用的MS Excel

中用于验证的分析方法,如方法连续稀释通过在MS Excel的校准曲线计算LOD和LOQ是更准确和可靠。的连续稀释法定义了LOD为,让你的时间的响应95%跨越稀释系列分析物的浓度。虽然到随后的稀释假定LOD(说的“x”)可能不能给出响应的95%的时间,有一个机会,之间的浓度假定LOD和“X”威力。因此,在连续稀释法的情况下,目前还没有确切的数字,就可以准确地/统计学术语的LOD。然而,它可以被用于验证已通过其他方法确定的LOD。[2]

在另一方面,使用MS Excel中的校准曲线的方法是基于响应的标准偏差(SD)(\西格玛)和斜率(校准曲线的S),[3]因此使得更准确。该SD(\西格玛) can be calculated for the Y-intercept and used to calculate the LOD and LOQ for a standard curve using the regression function in MS Excel (I use version 2013; however, you can use any version and it’ll work just fine) as follows.

第1步:绘制标准曲线

通过绘制分析物上的X轴的浓度和在Y轴的响应构建的标准曲线。假设响应正比于被分析物浓度,应绘制的线性曲线。

标准曲线的图像,用于确定在Excel LOQ和LOD
第2步:执行使用回归函数进行回归分析

回归分析的图像,用于确定在Excel LOQ和LOD

你可以找到在数据>数据分析>回归回归函数。根据回归方程,选择X和Y变量的数据。

回归分析的图像,用于确定在Excel LOQ和LOD
回归函数产生三个输出:回归统计,方差分析,和系数。回归统计告诉你的回归方程如何适合的数据,ANOVA向你回归模型中可变性的水平,和系数(最有用的部分)包括曲线的斜率和Y轴截距的SD。您现在有一个新的Excel表用计算LOD和LOQ所需的数据。

回归分析的输出的图像,用于确定在Excel LOQ和LOD
第3步:使用\西格玛小号在下面的公式的值来计算LOD和LOQ

LOD = [3.3 *(\西格玛/秒)]

LOQ = [10 *(\西格玛/秒)]

系数3.3和10被称为扩展系数和获得假设95%的置信水平。[4]

计算LOQ和LOD在Excel中
通过使用这种快速而简单的方法计算的LOD和LOQ为您的标准曲线,你可以依靠你的数据。试试这个方法来验证您的分析技术,让我们在评论中知道,如果你已经用Excel出色。

参考

  1. Armbruster的,D.A.,撬T.空白的限制,检测限和定量限。临床。生物化学。牧师29,增刊1(2008)。
  2. 瑞普,J.,分析检测限的指导和实验室指南确定方法检出限,自然资源,实验室认证计划,1996年https://books.google.co.in/books?id=7WtjHQAACAAJ的威斯康星州。
  3. Shrivastava,A.,古普塔,V.为检测限的确定和方法限制的分析方法定量的。历代青年科技。2,1(2011)。DOI:10.4103 / 2229-5186.79345。
  4. Desimoni,E.,Brunetti的,B.关于由信号来估计检测限制到噪声分析方法。医药。肛门。ACTA。如图6所示,4(2015)。DOI:10.4172 / 2153-2435.1000355。
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