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关于研究科学家的CRISPR指南

CRISPR研究中心给了你Sigma-Aldrich®先进的基因组学

无论您是需要帮助设计您的第一个CRISPR实验,您还在寻找故障排除提示,或者您想了解如何在您的研究中应用CRISPR,CRISPR研究中心为您提供了一些东西。

CRISPR是最着称为基因编辑工具,允许您轻松,精确地编辑DNA体外体内

然而,Carrpr技术已经发展超出基本基因编辑,随着工具和技术的开发,允许您编辑外观蛋白酶或甚至激活或抑制基因表达而不改变靶基因的下面的DNA序列。

在CRISPR中有很多信息,它可以感到压倒性。无论您想要如何处理CRISPR,我们仔细制作的资源允许您找到并摘要所需的信息。

你的Crispr的完整指南
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    CRISPR解释

    CRISPR基因编辑工作如何?

    如果你是执行CRISPR的新手,或者你想更新你的背景知识,关于CRISPR基因编辑如何工作,这是为你准备的部分。你可以发现这个基因编辑系统的历史并了解其组成部分,从原间隔空间-邻近基序(PAMs)到引导RNA (gRNA)。如果你不确定CRISPR是否是适合你实验的基因编辑系统,你可以将它与其他基因编辑系统进行比较,包括锌指核酸酶(ZFNs)和转录激活剂样效应核酸酶(TALENs)。

    描绘CRISPR基因组编辑的两只手改变DNA的图像

    CRISPR-Cas9基因组编辑工具简史

    了解CRISPR原核生物免疫应答系统最初是如何被发现的,以及CRISPR- cas9基因编辑工具的开发。

    描绘CRISPR基因组编辑的两只手改变DNA的图像
    编辑DNA的科学家的形象在Crispr技术中

    CRISPR技术:迈向CRISPR基因组!

    从根源中抓取CRISPR技术的概述,作为一种细菌防御系统,以如何在健康和研究中使用。

    编辑DNA的科学家的形象在Crispr技术中
    体重秤代表着对crispr cas9的利弊进行权衡

    CRISPR-CAS9基因组编辑:称重利弊

    在您的研究中发现CRISPRA的优缺点作为基因组编辑工具。

    体重秤代表着对crispr cas9的利弊进行权衡

    先进的CRISPR.

    使用高级应用程序将CRISPRED占用下一个级别

    如果您正在寻求做一些不仅仅是基本基因编辑,请探索针对CRISPR技术的惊人的适应。通过CAS9的修改版本,您可以使用Crispra和Crispri执行外延蛋白酶编辑和激活或抑制基因表达(不改变DNA)。

    使用工具进行修改的DNA,以表示改性的CRISPR核酸酶格式

    如何理解CRISPR格式及其应用程序

    找出CRISPR核酸酶的修饰变种是如何使基因编辑减少脱靶效应,甚至可以在不改变DNA序列的情况下控制基因表达的。

    使用工具进行修改的DNA,以表示改性的CRISPR核酸酶格式
    DNA转霉病的图像显示Crispr如何使用Crispra和Crispri来修饰基因表达

    为什么要考虑将CrisPra和Crispri添加到您的工具箱中

    找出CRISPR介导的基因激活(CRISPRa)和抑制(CRISPRi)是如何工作的,以及为什么除了CRISPR敲除之外,你应该考虑使用它们。

    DNA转霉病的图像显示Crispr如何使用Crispra和Crispri来修饰基因表达
    一个描述CRISPRa如何开启基因表达的灯开关

    基于crispr的激活(CRISPRa):一个操作指南

    Crispra允许您以更内源性的方式激活或过表达基因。找出入门的步骤。

    一个描述CRISPRa如何开启基因表达的灯开关
    一个僵尸抱着一个扳手描绘死Cas9用于外观蛋白酶杂志的有用性

    死亡有用:CRISPR-CAS9表观蛋白酶编辑

    想做一些外观蛋白酶编辑吗?发现催化活性(死亡)Cas9的有用性。

    一个僵尸抱着一个扳手描绘死Cas9用于外观蛋白酶杂志的有用性

    CRISPR应用程序

    发现CRISPR的各种应用

    您是否有特定的CRISPRPRED,并正在寻求帮助和指导?发现这些技术在研究中使用的各种方式,并在特定应用中获取如何使用它的提示,例如在难以转染细胞中执行CRISPR实验,如T细胞,我们还发现您需要明确扩展的内容CRISPR屏幕。

    微孔板的图像用于表明CRISPR如何扩展到进行CRISPR筛选。

    用Crispr升级你的药物筛查

    了解CRISPR如何扩大用于药物筛选的应用。

    微孔板的图像用于表明CRISPR如何扩展到进行CRISPR筛选。
    T细胞和癌细胞的形象突出了CRISPR可以用于增强T细胞抗癌能力。

    免疫肿瘤学的CRISPR方法

    T细胞对具有CRISPR的工程师来说可能是棘手的。在编辑这些单元格以及如何克服任何相关挑战时,找出关键注意事项。

    T细胞和癌细胞的形象突出了CRISPR可以用于增强T细胞抗癌能力。
    CRISPR研究中心

    多重CRISPR基因编辑:它的用途是什么?

    如果你需要多基因敲除或大规模的基因组修饰,或想减少脱靶效应,那么多重CRISPR为你服务!

    CRISPR研究中心
    果蝇的形象是代表果蝇在果蝇中编辑的crspr-cas9

    果蝇CRISPR-Cas9编辑速成班

    获取在果蝇中进行CRISPR-Cas9编辑的提示和技巧。

    果蝇的形象是代表果蝇在果蝇中编辑的crspr-cas9

    实验设计

    设置你的CRISPR实验的提示和技巧

    你准备好在你的实验室里开始了吗?本节带您通过CRISPR实验设计和设置的各个方面,从设计GRNA来选择用于提供CRISPR试剂的正确方法。我们还涵盖了各种交付格式,包括DNA,质粒和核糖核蛋白(RNP)复合物,并建议您如何选择正确的送货方式进行实验。

    用gRNA靶向DNA的CRISPR-Cas复合物图像

    CRISPR基因编辑:考虑和开始

    通过我们的关键注意事项,了解如何在您的实验中开始CRISPR基因编辑。

    用gRNA靶向DNA的CRISPR-Cas复合物图像
    室内设计的图像代表了如何设计Crispr实验

    如何设计CRISPR实验并开始基因组编辑

    设计CRISPR实验可能是令人生畏的。我们有提示和指针可以帮助您在右脚下车。

    室内设计的图像代表了如何设计Crispr实验
    微注射图像作为交付克里普尔普普尔的一种方式

    让CRISPR试剂进入细胞的四种方法

    阅读各种方法,用于提供CRISPR试剂以及如何在它们之间进行选择。

    微注射图像作为交付克里普尔普普尔的一种方式
    一条路,展示了Crispr的途径

    CRISPR Genome编辑:您需要知道的内容

    获得一些关于CASPRP的想法,以及使用它涉及的东西。

    一条路,展示了Crispr的途径

    故障排除

    CRISPR出现问题时对疑难解答

    如果你的实验不断出错,或者你得到了无法解释的结果,不要惊慌。我们有指南指导你如何对你的CRISPR实验进行故障排除,包括你需要使用什么控制来确保你可以有效地进行故障排除,以及如何解释令人困惑的结果。

    测序数据的图像描绘验证Crispr

    如何验证CRISPR实验

    发现如何验证您的CRISPR基因编辑,从成功递送CRISPR试剂,确认所需的遗传和表型变化。

    测序数据的图像描绘验证Crispr
    Valid这个词的图像强调了决定CRISPR成功的重要性

    如何确认你的CRISPR-cas9基因组编辑成功

    通过确定您的CRISPR实验的每个阶段的成功来调整您的故障排除能力。

    Valid这个词的图像强调了决定CRISPR成功的重要性

    最新的CRISPR文章

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    描绘CRISPR基因组编辑的两只手改变DNA的图像

    CRISPR-Cas9基因组编辑工具简史

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    一种侦探,如侦探,象征着象征着病毒诊断的降价和夏洛克克切方法。

    CRISPR如何用于检测新出现的病毒病原体

    发现两种基于CRISPR的病毒诊断策略,降低和夏洛克。

    一种侦探,如侦探,象征着象征着病毒诊断的降价和夏洛克克切方法。
    T细胞和癌细胞的形象突出了CRISPR可以用于增强T细胞抗癌能力。

    免疫肿瘤学的CRISPR方法

    T细胞对具有CRISPR的工程师来说可能是棘手的。在编辑这些单元格以及如何克服任何相关挑战时,找出关键注意事项。

    T细胞和癌细胞的形象突出了CRISPR可以用于增强T细胞抗癌能力。
    CRISPR研究中心

    多重CRISPR基因编辑:它的用途是什么?

    如果你需要多基因敲除或大规模的基因组修饰,或想减少脱靶效应,那么多重CRISPR为你服务!

    CRISPR研究中心
    一个僵尸抱着一个扳手描绘死Cas9用于外观蛋白酶杂志的有用性

    死亡有用:CRISPR-CAS9表观蛋白酶编辑

    想做一些外观蛋白酶编辑吗?发现催化活性(死亡)Cas9的有用性。

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    一个描述CRISPRa如何开启基因表达的灯开关

    基于crispr的激活(CRISPRa):一个操作指南

    Crispra允许您以更内源性的方式激活或过表达基因。找出入门的步骤。

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    Valid这个词的图像强调了决定CRISPR成功的重要性

    如何确认你的CRISPR-cas9基因组编辑成功

    通过确定您的CRISPR实验的每个阶段的成功来调整您的故障排除能力。

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    CRISPR术语

    CRISPR术语词汇表

    有没有CRISPR的术语,你不太确定?我们编制了一系列CRISPR术语,以帮助您出去。只需单击术语旁边的箭头即可查看定义。

    CRISPR-associated蛋白质。这是CRISPR复合物的核酸酶组分,这些蛋白质中最常见的是Cas9。

    CRISPR相关蛋白9。几种鉴定的Crispr核酸酶中的一种。CAS9核酸酶是最广泛使用的CRISPR核酸酶。CAS9的不同变体已从不同的物种中鉴定。识别的PAM序列在Cas9变体之间有所不同。

    CRISPR从Fvootella.弗朗西亚1。现在更常见的Cas12a更常见的Casup内切核酸酶。CAS12A以多种方式与CAS9不同:它较小,更简单,它造成交错而不是钝切割,它使用不同的PAM,并将远端切割到识别现场。这些差异使其成为CAS9的有用替代品。

    聚集,定期间隙,短文重复。给出序列的名称首先从中确定了CRISPR技术。现已用于指使用CRISPR核酸酶的基因编辑系统。

    CRISPR激活。使用催化活性CAS9(DCAS9)的技术将转录活化剂靶向特定的DNA /基因以激活靶基因表达。

    CRISPR抑制。使用催化活性CAS9(DCAS9)的技术将转录压缩机靶向特定的DNA /基因以抑制靶基因表达。

    CRISPR RNA。含有可变靶向序列的GRNA的组分,其负责靶DNA的CRISPR复合物的特异性。

    催化地死Cas9。这是一种Cas9的催化活性形式,由两种内切核酸酶结构域(Ruvc和HNH)中的点突变产生。这些点突变是D10A和H840A,并使核酸酶不能切割DNA。借助GRNA,核酸酶仍然可以针对特定的DNA靶向,并且通常与转录或表观遗传调节剂偶联以改变基因表达。

    供体DNA在CRISPR中使用同源定向修复(HDR)时是必需的。HDR允许精确的基因编辑,例如特定的插入和缺失或碱基取代。

    双股休息。这是切割DNA分子的两条链,留下完全断裂。

    功能的增益。这指的是被赋予的附加功能或通过突变/基因编辑增强的当前功能。这可以指激活或增加基因/非编码RNA (ncRNA)的表达。

    指导RNA。这是针对核酸酶的特定DNA序列的RNA。gRNA由支架RNA (tracrRNA)和可变靶向RNA (crRNA)组成,可以作为两个单独的RNA提供,也可以作为两个成分融合的单一引导RNA提供。

    同源定向修复是两个细胞DNA修复途径之一。HDR可用于CRISPR基因编辑,其中需要非常精确的基因编辑,包括特异性插入和缺失,或碱基取代。供体DNA需要作为修复中的模板。

    失去功能。这描述了导致蛋白质或ncRNA天然功能丧失的突变或基因编辑。在CRISPR基因编辑中,这可以指蛋白质/ncRNA表达的丢失/减少或非活性形式的表达(例如,缺失一个活性域的截断蛋白)。

    Crispr熄灭。这些是Cas9的修饰形式,其中两种内切核酸酶域之一的点突变,这导致它们“切断”一股DNA,而不是制造完整的双链断裂。两个克饼粘合在一起以产生所需的双链断裂。成对的缩乳有效地消除了偏离目标效果,随着每个酸氨酸酶一起使用的不同GRNA。

    异源end-joining是两个细胞DNA修复途径之一。NHEJ是CRISPR基因编辑中常用的途径,因为它比HDR更有效。然而,NHEJ也比HDR更容易出错。

    Protospacer-adjacent主题。核苷酸位于目标位点下游的~ 3-8个核苷酸序列,是核酸酶成功裂解目标DNA所必需的不同的核酸酶识别不同的PAM序列。

    核糖核蛋白复杂的。由CRISPR核酸酶蛋白质和GRNA组成的复合物,其可以递送到细胞中。

    单引导RNA。一种常见的gRNA格式,其中tracrRNA和crRNA融合成一个单一的RNA分子。

    逆激活CRISPR RNA。作为CRRNA与核酸酶之间的支架的GRNA的组分。

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